近日,分析化学学科TOP期刊Analytica Chemistry(IF = 6.986)发表我院刘丽芳、辛贵忠团队关于一氧化氮质谱探针检测方法的研究成果(https://pubs.acs.org/doi/abs/10.1021/acs.analchem.1c01259)。博士研究生钟竺君为第一作者,刘丽芳教授和辛贵忠副教授为共同通讯作者,中国药科大学为第一作者单位。
一氧化氮(Nitric oxide, NO)是一种重要的生理分子,其功能取决于其在生物系统特别是细胞中的浓度。以浓度为基础的细胞内NO分析可以为探索其在健康和疾病中的确切作用提供线索。然而,现有的检测细胞内NO的方法仍不足以进行定量分析。
由于NO半衰期短、反应活性高,质谱法对其准确分析具有挑战性。合理的方法是开发一种合适的分子探针,该探针需要具备几个特质,例如可与NO快速反应;反应生成稳定的产物;产物具有独特的质谱响应,不易受到生物基质的干扰。基于以上,本研究报道了一种定量质谱探针方法来测量细胞中NO水平。该探针氨氯地平(AML)包含一个汉斯酯,与NO反应形成吡啶,产生脱氢氨氯地平(DAM)。通过超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)对DAM进行定量,可以对细胞内NO的水平进行准确测量。
通过对细胞直接AML处理或给细胞加入外源NO供体如硝普钠,证明了基于该质谱探针的方法能够测量细胞内的内源性和外源性NO。因此,以AML为探针开发的UPLC−MS/MS定量方法有望成为一种分析细胞内NO的新方法。
虽然该方法的开发是为了评估细胞内NO水平,但未来的研究可能会将其应用范围从培养细胞扩展到完整的生物体。受到呼出气溶胶的基于质谱的分析启发,将该质谱探针方法与固相微萃取(SPME)技术相结合可能有助于研究人类和动物呼出的NO。
综上所述,本研究提出AML可以作为一种外源性分子探针,将NO变为易于识别的分子,并通过基于质谱的方法进行准确定量。
(撰写人:生药系 辛贵忠)
CopyRight CPU ZHONGYAOXUEYUAN [ 中国药科大学中药学院主页] All Rights Reserved
地址:江苏省南京市江宁区中国药科大学中药学院